產(chǎn)品上新|長片段cDNA合成難題破解！超低 RNase H活性反轉(zhuǎn)錄酶重磅上新!

繼鎂孚泰高特異性MMLV反轉(zhuǎn)錄酶（Cat.No.LT001-01）以“高RNA依賴活性+低DNA依賴活性”解決非特異性擴(kuò)增難題后（點(diǎn)擊了解），鎂孚泰MMLV反轉(zhuǎn)錄酶篩選試劑盒再添創(chuàng)新力作——Longscript MMLV RTase Screening Kit（Cat.No.LT002-01）！這款專為長片段cDNA合成設(shè)計(jì)的產(chǎn)品，通過極致降低RNase H活性，顯著提升模板利用率，攻克長鏈RNA反轉(zhuǎn)錄過程中的模板降解難題，助力基因表達(dá)分析、cDNA文庫構(gòu)建、RNA測序等前沿研究邁向更高精度！

但如果RNase H活性較強(qiáng)，在cDNA合成過程中，RNA模板可能會在cDNA合成完成之前就被降解，導(dǎo)致cDNA鏈的長度較短，所以RNase H活性是長片段cDNA合成過程中需要規(guī)避的因素。此外，RNase H活性還可能會與反轉(zhuǎn)錄酶中的聚合酶活性競爭，從而降低反轉(zhuǎn)錄效率。以上特性極大的影響了基因表達(dá)分析、cDNA文庫構(gòu)建、RNA測序等實(shí)驗(yàn)研究的精準(zhǔn)性。比如在RNA測序?qū)嶒?yàn)中，需要獲得高質(zhì)量、完整的cDNA文庫。高RNase H活性可能會破壞RNA模板，影響cDNA文庫的構(gòu)建質(zhì)量，導(dǎo)致測序結(jié)果的準(zhǔn)確性降低，無法準(zhǔn)確反映原始RNA的表達(dá)情況和序列信息。

圖1.RNase H活性的影響。

為了提高長片段cDNA合成效率，提升實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，鎂孚泰生物依托ZymeEditor定向進(jìn)化平臺，融合五大酶改造技術(shù)，特別開發(fā)了一款長片段合成MMLV反轉(zhuǎn)錄酶篩選試劑盒——Longscript MMLV RTase Screening Kit（Cat.No.LT002-01）。該試劑盒包含10種長片段合成MMLV反轉(zhuǎn)錄酶突變體，它們均在MMLV野生型反轉(zhuǎn)錄酶的基礎(chǔ)上通過定向進(jìn)化技術(shù)改造，實(shí)現(xiàn) RNase H 活性的顯著降低，有效提升 cDNA 產(chǎn)量與長片段合成效率，為全長 cDNA 獲取等提供優(yōu)質(zhì)模板，大幅提升后續(xù)研究的準(zhǔn)確性。

圖2:鎂孚泰生物 ZymeEditor 平臺五大酶改造技術(shù)。

如圖3數(shù)據(jù)所示，與野生型（Wild type，WT）相比，鎂孚泰長片段合成MMLV反轉(zhuǎn)錄酶篩選試劑盒（Cat.No.LT002-01）中10種突變體的RNase H/RNA依賴的DNA聚合酶活性(RDDP)活性比值均顯著降低，大部分突變體的該比值僅為WT的20%以下，展現(xiàn)了突變體在相同聚合酶活性下，具有極低的RNase H活性。

圖3：以WT的RNase H活性與RDDP活性的比值為100%，鎂孚泰長片段MMLV反轉(zhuǎn)錄酶篩選試劑盒（Cat.No.LT002-01）10種酶相對WT的RNase H/RDDP活性比值數(shù)據(jù)圖。